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BCM-2501
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Envoyée par : Josée Frappier
Répondue par : Alexandre Viau
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2004-04-14
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Question
#113
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Plusieurs graphiques des notes montrent le pourcentage de l'activité enzymatique retrouvée ou de configuration native retrouvée suite à une dénaturation et renaturation dans diverses conditions. Comment est-ce que le pourcentage de l'activité enzymatique/de renaturation retrouvée peut être déterminé ? |
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Réponse
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Bonjour Josée,
Pour le pourcentage d'activité enzymatique retrouvé, il s'agit de comparer l'activité obtenue par essai enzymatique de base avant et après la dénaturation. Par exemple, on peut utiliser un substrat qui produit une couleur détectable par spectrométrie et déterminer l'activité enzymatique avant la dénaturation et après la renaturation. En divisant après/avant on obtient le pourcentage de l'activité enzymatique retrouvée. Il s'agit en fait de trouver une façon facile de suivre l'activité de l'enzyme, afin de voir quand elle redevient fonctionnelle et à quel degré.
Pour ce qui est du pourcentage de renaturation, on utilise plusieurs techniques qui permettent d'avoir une idée générale du repliement de la protéine. Une des plus utilisée est le dichroïsme circulaire ou l'absorption d'UV. Vous avez survolé ces techniques avec le Dr Michnick.
Bonne chance à tous,
Je vais essayer de répondre à vos questions si vous en posez avant demain matin.
Alex
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