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BCM-1521
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Envoyée par : Zoé Morin
Répondue par : Julien Desroches
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2004-09-20
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Question
#146
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Je voudrais savoir pourquoi dans une centrifugation en gradient de concentration de zone les particules migrent en fonction de leur nombre S alors que dans une centrigation isopycnique les particules migrent en fontion de leur densité. |
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Réponse
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Bonjour,
Le principe de l’ultracentrifugation zonale repose sur le coefficient de sédimentation. L’échantillon est déposé sur un gradient de saccharose par exemple ou de glycerol. Ces solutions ont la propriété de réduire les mouvements de convection des molécules et donc de stabiliser la séparation des molécules/organelles. Il est important de noter que la densité du milieu est toujours inférieure à celle des organelles ou des macromolécules. Cette méthode sépare les molécules en fonction de leur poids moléculaires et de leur forme dans le cas des organelles. Ainsi, la durée de centrifugation doit être déterminé de façon à obtenir une bonne séparation des macromolécules/organelles et éviter ainsi que toutes les molécules se retrouvent au fond du tube qui est centrifugé.
Dans le cas de l’ultracentrifugation isopycnique, les macromolécules/organelles sont séparées uniquement en fonction de leur densité. Pour cela, le gradient de densité du milieu doit contenir l’intervalle de densité des macromolécules/organelles. Ainsi, les molécules/organelles se stabilisent au cours de la centrifugation là ou la densité du milieu est égale à la leur.
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Étudiants
