Envoyé par : Étudiant(e) Biochimie
Répondu par : Marieke Rozendaal
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2010-04-17 |
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Bonjour,
Dans le cours de Madame Trudel du 12 avril, en concernant le diapos à la page 23 "Recombinaison homologue", le prof a dit qu'il faut avoir 2 cassettes de sélection (cassette négative et cassette positive) dans le vecteur. Je ne comprends pas c'est quoi exactement leur rôle. Merci beaucoup! |
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Bonjour,
Positive-négative sélection: En général un gène de résistance à une drogue (Neo, Puro) est introduit dans la région d’homologie: sélection positive. La cassette va être incluse dans le génome après la recombinaison, les cellules seront résistantes au drogue. Une cassette de sélection négative (gène toxique pour la cellule, ex. TK ou DTA) est introduite à l’extérieur de la région d’homologie. Cela permet d'exclure des cellules qui n'ont pas fait de recombinaison homologue. (Perte du gène après la recombinaison homologue uniquement.) Bonne continuation, Marieke. |
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