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BCM-2502
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Envoyée par : Ousmane Diallo
Répondue par : Marie-Claude Sincennes
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2004-10-14
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Question
#164
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Dans le cours, il est dit que: "si un ADN est tres long pour etre clone en une seule fois, il faut faire la marche chromosomique".
J'ai pas bien compris le principe de la "marche chromosomique", est-ce que vous pouvez m'expliquez comment ca marche? |
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Réponse
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Bonjour!
Le principe de marche chromosomique est bien expliqué dans le manuel: "Introduction à l'analyse génétique" de Griffiths, dont l'achat est suggéré dans le bacc en biochimie, mais que tu peux consulter à la bibliothèque. Dans la version que je possède, l'explication se trouve dans le chapitre 14, p. 439-441.
Brièvement, si un ADN est trop long, il ne se retrouvera pas entièrement dans un seul clone de la banque, mais bien en petits fragments dans différents clones. Ta première sonde te permettra d'identifier un premier clone de la banque, puisque les séquences seront correspondantes. Ensuite, tu utilises le clone que tu viens d'identifier comme sonde pour faire un autre criblage de ta banque. Tu trouves un autre clone, etc... Les clones identifiés correspondront à des régions d'ADN qui chevauchent le clone initial. Voici un exemple:
Avec ta première sonde (AAGGTGCACC), tu trouves le clone1 GGTGCACCGGTGCA
Ta nouvelle sonde étant le clone1, tu trouves le clone 2: ACCGGTGCATTTAGCCA
Puisque les séquences se chevauchent, tu trouves la séquence de ton gène qui était
AAGGTGCACCGGTGCATTTAGCCA.
J'espère que ça t'éclaire un peu et bonne chance!
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