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BCM-2502
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Envoyée par : d m
Répondue par : Marie-Claude Sincennes
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2004-11-03
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Question
#175
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J'ai une question concernant la ARN poly de E. Coli.
Est-ce que cette enzyme necessite que le promoteur et l'operateur se suivent pour amorcer la transcription? C'est-a-dire que si j'introduisais un insert dans un vecteur d'expression dans le site de multiclonage qui est precede par un promoteur mais que mon insert est a l'envers (donc son operateur ne se situe pas apres le promoteur) j'obtiendrais la protéine à l'envers ou bien la poly ne commencerais meme pas la transcription?
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Réponse
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Bonjour!
Voici la définition d'un opérateur: une région de l’ADN sur laquelle se fixe un répresseur pour contrôler l’expression d’un gène ou d’un groupe de gènes. En théorie, l'enzyme polymérase n'a pas besoin de l'opérateur pour effectuer la transcription. Au contraire, l'opérateur sert à inhiber la transcription car un réprersseur se lie sur le site opérateur et empêche l'ARN polymérase de progresser. Si l'opérateur n'était pas là, la transcription aurait certainement lieu. L'ARN polymérase a besoin du promoteur car c'est là qu'elle reconnait une séquence d'ADN et qu'elle se lie. Mais l'ARN polymérase ne reconnait pas particulièrement l'opérateur.
D'autre part, l'opérateur n'est pas toujours situé entre la promoteur et la région codante. Par exemple, dans l'opéron tryptophane, l'opérateur est situé à l'intérieur de la séquence du promoteur.
Dans ton exemple d'insert à l'envers, je crois que la transcription aurait lieu et que tu aurais un messager à l'envers. Toutefois, tu n'aurais sûrement pas une protéine à l'envers, car la traduction ne pourrait pas avoir lieu. Le site d'initiation de la traduction serait perdu!
Maintenant, est-ce que le répresseur qui se lie sur l'opérateur à la fin de la région codante pourrait toujours inhiber la transcription? Je crois que oui, mais que ca dépend de l'opérateur, du répresseur et du gène!
J'espère que ca répond à ta question, bonne journée!
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